浅谈影响油乳剂疫苗黏度与稳定性的因素

       1、适量的硬脂酸铝  

        硬脂酸铝在油乳剂中是一种助悬剂，是影响油乳剂疫苗黏度的一个重要因素，加入适量可减少液珠的沉降，增强油乳剂的内相黏度，降低液珠之间的碰撞几率，最终可增加油乳剂疫苗的稳定性，但是，在同一油/水相比情况下,随着硬脂酸铝含量的增加，其黏度有升高的趋势。    

        当油/水相比的大小较高时，随着硬脂酸铝含量的加大，其黏度有增加的趋势，此时低含量硬脂酸铝是有利于降低油乳剂的黏度，但会出现分层现象，影响油乳剂的稳定性；相反，当油/水相比的大小较低时,随着硬脂酸铝含量的加大，其黏度同样存在增加的趋势，此时高含量硬脂酸铝会使油乳剂的黏度出现过高现象而不符合《规程》的规定，据有关资料报道，当油/水相比分别为3:1、2:1和1:1时，相应油相中适量的硬脂酸铝含量应分别为2%、1%与0.5%，此时制备的油乳剂疫苗的黏度、稳定性均达到《规程》的质量要求。这说明随着油/水相比的大小降低，油相中硬脂酸铝含量相应降低，呈正比例关系。

        2、采用混合的乳化剂

       要获得优良的油乳剂疫苗，应将灭活抗原高度分散于白油中，就要使油与水的界面张力降低。乳化剂的一个主要功能就是降低界面张力，从而使水相充分分散于油相之中。

        在加有乳化剂油/水相体系中，经过机械力作用，界面张力降低，同时界面发生吸附，形成界面膜，界面膜具有一定强度，对分散相液珠具有保护作用，使得液珠在相互碰撞时不易聚结。研究发现，单一、纯净的乳化剂所形成的界面吸附膜的膜排列不够紧密，膜强度不高。而混合的乳化剂，以及混有杂质的乳化剂，则比单一、纯净的膜强度大为提高，表面吸附分子排列紧密。一般认为，在混合乳化剂使用后，界面上有“复合物”生成，膜的强度增加，表面张力降至极低值且不易破裂，因此液珠不易聚结，油乳剂更具有稳定性。

        以Span -80与Tween-80组成的混合乳化剂在兽用油乳剂疫苗中得到了广泛的使用，其混合HLB值（亲水亲油平衡值）成为制备稳定油乳剂的重要参数，且调整主要利用Span-80与Tween-80的配比来进行。具有良好免疫效果的油乳剂多为W/0型，这需要调整HLB值以达到制取稳定油乳剂目的，一般HLB值应小于8。

        3、恰当的油/水相比

        油乳剂黏度影响油乳剂疫苗的稳定性，黏度越大，则分散相液珠运动速度越慢有利于油乳剂的稳定，但是，高黏度不利于机体免疫，而低黏度容易造成油乳剂不稳定，因此油/水相比的大小有一定范围。

        如欲降低油乳剂的黏度，可以增加油相的比例，例如以油/水相比为2:1、3:1，最高可达4:1时，亦能获得良好的W/0型油乳剂疫苗，但是随着油/水相比的升高，除了前面所提到为了制备的油乳剂疫苗的黏度、稳定性均达到《规程》的质量要求，导致硬脂酸铝用量需相应提高外，还有重要一点，即此时制备的油乳剂疫苗中的单位抗原含量偏低，为达到免疫效果，则不得不增大注射剂量或增加免疫次数，增加临床兽医人员工作强度，再者如需提高每种抗原滴度，虽可以通过浓缩等方式增加单位体积抗原滴度，但在制苗过程增加工艺程序以致可能会增加污染机会。相反，油/水相比的大小较低时，硬脂酸铝用量相应减小，但是生产油乳剂疫苗时需要大量的抗原，增大了生产成本。所以在恰当油/水相比下，制备的油乳剂疫苗不但稳定性良好、黏度低及均达到《规程》的质量要求，而且疫苗中抗原含量适中，生产成本适宜。

        4、适当的乳化程度与时间

        乳化机乳化速率对油乳剂疫苗稳定性的影响极大。分散相在强大机械力的作用下分散越来越均匀，形成的油乳剂颗粒越均匀细密，故疫苗就越稳定。但当乳化速率达到一定程度后继续增大强度，疫苗的稳定性提高较小，颗粒之间碰撞较多，容易分层导致破乳。再者，高速剪切搅拌对于油/水相体系产热明显，大量的机械能被转化为热能的形式，而热能会对水相中的抗原蛋白产生不利影响。

        同样，油水两相经强烈搅拌乳化形成比较稳定的油乳剂疫苗需要一定时间。随着搅拌乳化时间的增加，疫苗的稳定性相应增加，但超出一定时间后，油乳剂中的液珠可能因为相互碰撞和离心沉降的作用有聚结的趋势，影响了疫苗的稳定性。一般来说，乳化时从加完水相计起，8000－10000rpm，乳化5－6min为佳。

        5、白油的品质

        制备油乳剂疫苗用的白油，目前国产的有杭州炼油厂生产的10号白油，国外产的白油有Drakocel-6VR、Marcol-52和Lipolul-4。在国内制备兽用疫苗尤以Marcol-52常用，其以黏度低、流动性好和吸收充分等特点成为目前公认的质量较好的白油佐剂。在同样条件下使用进口Marcol 52白油乳化的油乳剂疫苗，黏度明显低于使用国产10号白油的黏度，这可能是进口Marcol 52白油自身的黏度及紫外吸收值、紫外消光系数等方面优于国产10号白油的缘故。