最近收到不少客户送检的血液样品,发现由于采血或运输不当等原因造成溶血,那么这些溶血的血清对ELISA的检测结果会不会造成影响呢?影响到底有多大?下面为您一一解答。
1、什么是溶血?
红细胞破裂,血红蛋白逸出称红细胞溶解,简称溶血。
2、溶血的血清不能用于抗体检测吗?
溶血程度对血清检测NSE(神经元特异性烯醇化酶)结果会有很大的影响。经研究表明:当血清中Hb(平均红细胞)含量≥0.685g/L时,就会使血清NSE出现假阳性,每增加1g/L的血红蛋白,就会使NSE含量增加23.764 ug/L。NSE含量随溶血程度的增加而增加。同时血清的颜色也会对吸光度造成影响,也就是说溶血后,抗体检测OD值会发生变化,可能会出现假阳性,导致误判。那么溶血对检测结果具体会造成怎样的影响呢,我们还是看下面一组数据来说明:
常用的几种ELISA抗体检测(IDEXX)
以IDEXX试剂盒为例,上述实验是一块板同时检测的结果,经过多次试验验证显示,溶血对于同一批次血清有一定的影响。对于样品OD值影响幅度在0.03-0.1之间,对于阴性或者强阳性样品的检测结果影响不大,但对于疑似可疑样品影响较大,直接影响阴阳性的判定。因此对于溶血血清进行抗体测定时,出现阴性值较高,阳性值偏低及可疑样品时需慎重处理,这样得出的结果不太准确,不宜用抗体指标来决定样品的阴阳性。
3、既然溶血还是会对检测造成一定的影响,甚至有些直接影响结果的判定,那该怎么做才能避免溶血呢?
一、样本处理
将采集好血液的注射器拉到最大量程后斜放在桌面上,静置1~2个小时,使血液凝固。待血清析出后,拔掉针头,将析出的血清缓缓注入灭菌离心管中。注意不要注入凝血块,盖上离心管盖,用记号笔做好标记。血清颜色呈浅黄色、半透明较好。
二、送检
将血清样品标好编号、连同样品信息登记单一同放入装有冰袋的泡沫箱内、固定送检,宜冷冻保存运输。
作者简介
陈珊,西北农林科技大学预防兽医学硕士,就职于广东永顺生物制药股份有限公司质检部,现任分子检测组主管,负责公司疫苗原辅材料,半成品,成品及重大科研项目相关的分子生物学检测。